神经干细胞移植如何有效进行分离培养

研究表明，神经干细胞移植体外培养的重要特征是神经干细胞在短时间内（24h）聚集。无血清培养2-3代后，部分细胞死亡，几乎全部为神经干细胞。巢蛋白是神经干细胞的标志蛋白，是分布于细胞质中的中间纤维，是哺乳动物神经干细胞的主要细胞骨架蛋白。

研究表明，CD133*cd3cd45是神经干细胞的特征表型。从扩增的cd133*cd34cd45细胞中分离出的单个细胞仍然可以培养和扩增神经球，并可以分化为神经元和神经胶质细胞。中科博盛。

体外获得神经干细胞的三种方式

①逆转录病毒转移原癌基因使细胞永生化；

②表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞生长因子（BFG）是强促分裂原，在体外可促进胚胎和成年哺乳动物神经干细胞的长期增殖和抑制分化；

③可诱导ESC分化为神经干细胞。在外界刺激或去除生长因子的条件下，细胞开始分化为各种成熟的神经细胞和神经胶质细胞。为了维持神经干细胞在体外的稳定生长和增殖。中科博盛。

目前，常用基因转移的经典方法来阻止其分化和建立神经细胞系。引入的基因包括2-myc、neu、p53、腺病毒EIA和SV40大T抗原热敏感突变体。当向培养系统中加入四环素以降低VMy的表达时，细胞增殖被阻止并出现神经元分化。