人类胚胎干细胞如何产生

目前，一些报道描述了在世界各地的各种实验室中人类胚胎干细胞系的建立，并且利用了多种人类胚胎干细胞衍生方法。通常，ICM的免疫外科隔离是由Solter和Knowles在1975年开发的一种方法，已成为进行胚胎干细胞衍生的大多数实验室的普遍做法。免疫外科手术的基本原理是利用抗体/补体反应裂解滋养外胚层。

首先，用链霉蛋白酶处理膨胀的胚泡以溶解透明带。然后用抗人全血清抗体和豚鼠补体处理不含ZP的胚泡。将胚泡及其溶解的滋养外胚层在新鲜培养基中冲洗，然后从溶解的滋养外胚层中分离出ICM。然后将分离的ICM在涂有明胶的组织培养皿中的有丝分裂失活的饲养细胞层上培养，从而产生人胚胎干细胞系。

然而，免疫外科手术并非在所有情况下都是选择的方法。由于在人类胚胎干细胞的衍生中使用了体外发育的胚泡，并非所有胚胎结果都会发育成良好的膨胀胚泡，其特征是大而独特的ICM。在某些情况下，这些胚胎表现出较小的ICM。在许多情况下，囊胚还表现出定义不清的ICM。近期，根据囊胚的质量，我们引入了三种可用于人类胚胎干细胞衍生的方法。这些方法是免疫外科手术方法，整个胚胎培养方法和部分胚胎培养方法。如上所述，免疫外科技术已经成为人类胚胎干细胞衍生的常用方法。

但是，如果人胚胎干细胞来源于带有较小或不明显ICM的胚泡，则这种方法与ICM丢失的可能性很高。免疫外科方法还与动物病原体污染人胚胎干细胞的风险显着相关。为了解决这些问题，已经开发了部分和整个胚胎培养方法。整个胚培养方法可用于通过将整个胚泡直接播种到饲养层上而将整个胚泡（没有透明带）植入而建立人胚胎干细胞系。不管胚胎的质量如何，都可以使用此方法，但是对缺乏可见ICM的胚泡很有效。然而，在人类胚胎干细胞衍生的初始步骤中，滋养表皮过度生长倾向于阻碍ICM的扩展。

因此，开发了部分胚胎培养方法，可用于从具有较小ICM的胚泡中衍生人胚胎干细胞。用超细玻璃移液管对包含ICM的区域进行手术隔离，可改善滋养外胚层的过度生长。该方法也适用于具有大而独特的ICM的囊胚，并且该方法的效率与免疫外科方法相似。Kim等人开发的部分胚胎培养方法。

整个胚胎培养方法是使人类胚胎干细胞衍生过程中动物病原体污染风险较小化的技术。因此，当考虑人胚胎干细胞的治疗应用时，我们发现部分胚胎培养方法和整个胚胎培养方法都是合适的。综上所述，考虑到囊胚和ICM的质量，选择合适的方法可能会导致更有效的人类胚胎干细胞衍生。